网站地图 Rss 繁體

/images/logo.png

当前位置: 首页 >> 实验动物 >> 实验动物技术 >> 正文
服务热线:0577-86689908 86699345

实验室常用溶液的配制(1)

.常用贮液与溶液

1mol/L亚精胺(Spermidine:

溶解 2.55g 亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于 -20℃

1mol/L精胺(Spermine):

溶解 3.48g 精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于 -20℃

10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):

77.1g 乙酸胺溶解于水中,加水定容至 1L 后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA):

100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,
须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于 -20℃

1mol/L二硫苏糖醇(DTT):

在二硫苏糖醇 5g 的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于 -20℃ 。或转移100mg的二硫苏糖醇
至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾(potassium acetate):

溶解 78.5g 乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml

1mol/L氯化钾(KCl):

溶解 7.46g 氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml

3mol/L乙酸钠(sodium acetate):

溶解 40.8g 的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH5.2,再加水定容到100ml

0.5mol/L EDTA:

配制等摩尔的Na2EDTANaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。或称取 186.1g Na2EDTA·2H2O 20g NaOH,并溶于水中,定容至 1L

1mol/L HEPES

23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOHpH6.8-8.2),然后用水定容至100ml

1mol/L HCl

8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。

25mg/ml IPGT

溶解250mgIPGT(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)于10ml水中,分成小份贮存于 -20℃

1mol/LMgCl2:

溶解 20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中,定容到100ml

100mmol/L PMSF

溶解174mgPMSF(苯甲基磺酰氟)于足量的异丙醇中,定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹
或贮存于 -20℃

20mg/ml蛋白酶Kproteinase K):

200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于 -20℃

10mg/mlRnase(无Dnase)(Dnasefree Rnase):

溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH 5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/LTrisHClpH7.5,于 -20℃ 贮存。(配制过程中要戴手套)

5mol/L氯化钠(NaCl):

溶解 29.2g 氯化钠于足量的水中,定容至100ml

10N氢氧化钠(NaOH):

溶解 400g 氢氧化钠颗粒于约 0.9L 水的烧杯中(磁力搅拌器搅拌),氢氧化钠完全溶解后用水定容至 1L

10SDS(十二烷基硫酸钠):

称取100gSDS慢慢转移到约含 0.9L 的水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至 1L

2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):

溶解 36.4g 山梨(糖)醇于足量水中使终体积为100ml

100%三氯乙酸(TCA:

在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。(稀释液应在临用前配制)

2.5 Xgal5--4--3-吲哚-β-半乳糖苷):

溶解25mgXgal1ml的二甲基甲酰胺(DMF,用铝箔包裹装液管,贮存于 -20℃

DEPC(焦碳酸二乙酯)处理水:
100ul DEPC 100ml 水中,使DEPC的体积分数为0.1%。在 37℃ 温浴至少12h,然后在15 psi 条件下高压灭菌20min,以使残余的DEPC失活。DEPC会与胺起反应,不可用DEPC处理Tris缓冲液。

甲酰胺(deionized formamide
直接购买或加Dowex XG8 混合树脂于装有甲酰胺的玻璃烧杯中,用磁力搅拌器轻轻搅拌1h,可去除甲酰胺中的离子。经Whatman 1号滤纸过滤除去树脂后分成小份,充氮气于 -80℃ 贮存(防止氧化)。

磷酸缓冲液(phosphate buffer
按照下表所给定的体积,混合1 mol/L 的磷酸二氢钠(单碱)和1mol/L 磷酸氢二钠(双碱)贮液,获得所需pH的磷酸缓冲液。配制1 mol/L 的磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)贮液:溶解 138g 于足量水中,使终体积为 1L ;1mol/L 磷酸氢二钠(Na2HPO4)贮液:溶解 142g 于足量水中使终体积为 1L


Tris缓冲液(Tris-HCl buffer
121g Tris碱溶解于约 0.9L 水中,再根据所要求的pH 25℃ 下)加一定量的浓盐酸(11.6N),用水调整终体积至 1L

1%溴酚蓝(bromophenol blue
1g 水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。

1%二甲苯青FFxylene cyanole FF
溶解 1g 二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml

10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide
小心称取 1g 溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管,于 4℃ 贮存。